腦立體定位儀又稱腦固定裝置(英文名:stereotaxic apparatus),它是利用顱骨外面的標(biāo)志或其它參考點(diǎn)所規(guī)定的三度坐標(biāo)系統(tǒng),來確定皮層下某些神經(jīng)結(jié)構(gòu)的位置,以便在非直視暴露下對(duì)其進(jìn)行定向的刺激、破壞、注**、引導(dǎo)電位等研究。
(1)動(dòng)物麻醉:小鼠,體重20-30g,稱重后以0.4%****鈉腹腔麻醉注射時(shí)必須緩慢,隨時(shí)注意動(dòng)物狀態(tài)。
(2)小鼠頭部固定:將小鼠的門齒固定于腦定位儀上頜固定器,然后把一側(cè)的耳捧推入動(dòng)物的外道后,使動(dòng)物的頭在處于兩滑道正中。再將另一耳捧推入另一側(cè)的外耳道。這時(shí)觀察兩個(gè)耳棒的刻度一致后,將兩耳棒上的固定螺絲扭緊,在將牙齒固定器上壓鼻環(huán)壓下后扭緊(鼻環(huán)、耳棒的松緊度調(diào)節(jié)適宜為好),這時(shí)從各個(gè)方向推壓動(dòng)物頭部"均不會(huì)出現(xiàn)移動(dòng)。
(3)開顱鉆孔前的備皮:剪去動(dòng)物頭部毛,用2%碘酒及75%酒精棉球作頭部皮膚的**,沿矢狀縫作一3cm長(zhǎng)的皮膚切口,分離皮下組織,用雙氧水清潔顱骨表面的筋膜及肌肉并剝離,推開骨膜,暴露前囟、人字縫及矢狀縫。
(4)確定標(biāo)準(zhǔn)中線:將金屬定位針向下移動(dòng)到矢狀縫上方后,再前后移動(dòng)定位針,使定位針定位到前囟。
(5)小鼠海馬定位:用定位針在前囟后2mm, 矢狀縫旁開2.5mm處定位一點(diǎn),即為海馬的平面位置,然后在此點(diǎn)上用鉆孔針在顱骨上鉆一小圓孔。
(6)注射**:小鼠海馬則位于該圓孔下2 mm,將1ml注射器吸入**安置到MC-5微操作儀上,操作儀器使注射器針頭由小鼠腦鉆孔處下降2mm時(shí)完成**注射到小鼠腦海馬處。
(7)制作腦組織切片:將小鼠腦制作成切片,顯微觀察小鼠腦中紅染料位置來驗(yàn)證小鼠腦海馬中是否定位準(zhǔn)確。
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