一、實驗?zāi)康?/strong>
1、學(xué)習(xí)小白鼠學(xué)習(xí)記憶行為檢測方法
2、學(xué)習(xí)小鼠避暗自動測試儀的使用方法。
3. 了解影響學(xué)習(xí)記憶功能的一些因素。
二、實驗原理
嚙齒類動物系夜行性動物,喜歡黑暗的地方,而回避光亮之地。它將設(shè)法逃向暗處,此時在暗處給予其電刺激,小鼠會被迫逃回明亮處,并獲得記憶。根據(jù)此原理設(shè)計的實驗為一次性被動回避反應(yīng)實驗。
被動回避反應(yīng)(Passive Avoidance Response)為二十世紀(jì)60年代后期發(fā)展起來的、普遍用于檢測小動物學(xué)習(xí)記憶能力的一種動物模型。反應(yīng)特征:動物必須學(xué)會躲避可怕的事件,而抑制其天然本性。被動回避反應(yīng)有:避暗法(又稱步入法step-through test)、跳臺法(又稱步下法step-down test)等。
三、實驗器材
小白鼠常用手術(shù)器械、亞**鈉、東莨菪堿(scopolamine,Scop.)、生理鹽水、35 %酒精。(廠家:北京智鼠多寶生物公司))
四、實驗步驟
1. 實驗 儀器
北京智鼠多寶生物科技發(fā)展有限責(zé)任公司小鼠避暗自動測試儀由控制器和活動箱兩部分組成,可同時對6只小鼠進(jìn)行實驗。明暗實驗箱之間有一小門供動物進(jìn)出,當(dāng)動物進(jìn)入暗室被電擊時,它可自動記錄小鼠**次從明室進(jìn)入暗室的潛伏期和受到電擊的次數(shù),還可通過按鍵靈活地選擇刺激電壓和設(shè)置實驗時間。
2. 實驗程序:
2.1適應(yīng):將動物頭朝室壁放入明室,兩室之間的門洞敞開,讓動物在兩室內(nèi)自由活動2-3分鐘,取出后放回飼養(yǎng)籠。
2.2訓(xùn)練:**天, 將動物放入明室, 它很快鉆入暗室, 連接兩室的門洞關(guān)閉,同時啟動電刺激器, 動物足部受電擊。如果動物在**次訓(xùn)練時超過100秒不進(jìn)暗室, 淘汰之或用手把它輕輕趕進(jìn)暗室。
記錄指標(biāo):
(1)記錄動物自明室進(jìn)入暗室的潛伏期,可作為判斷給藥后動物行為是否有變的一個指標(biāo)。若**致使動物**,則潛伏期顯著長于對照組。
(2)記錄動物受到電擊后的反應(yīng),如劇烈嘶叫并跳躍,評為A級反應(yīng);微弱尖叫,評為B級反應(yīng);不叫,評為C級反應(yīng)。受到電擊后動物一般均跳躍。C級反應(yīng)常伴動物跳躍,動物雖不尖叫,但正常動物均能感受電擊疼痛,顯示好的記憶成績。C級反應(yīng)多見于雄性動物。A級反應(yīng)多見于雌性動物。該記錄可作為動物痛域是否變化的一個輔助觀察指標(biāo)。
2.3重測試:訓(xùn)練后24小時(第三天),再次將動物放入明室,進(jìn)行重測試。
記錄指標(biāo):
(1)記錄動物進(jìn)入暗室的潛伏期,為步入潛伏期(step through latency, STL)。*大潛伏期設(shè)為300秒。
(2)記錄動物300秒內(nèi)進(jìn)入暗室的錯誤次數(shù),包括**次錯誤進(jìn)入暗室的次數(shù)。
實驗設(shè)計舉例
按照信息論將記憶簡單劃分為:記憶的獲得(也即學(xué)習(xí)過程、信息的獲得過程)、記憶的鞏固(信息的保持過程)、記憶的再現(xiàn)(信息的提取過程)時,我們可依此來篩選作用于記憶不同階段的認(rèn)知**。
在訓(xùn)練前、后或重測前給損傷動物記憶的**,可分別觀察該**對記憶不同階段的影響,在此之前給動物待檢測認(rèn)知**,即可依據(jù)實驗結(jié)果判斷該認(rèn)知**對抗損傷**的效果。為簡化篩選工作,常選用實驗步驟較少的小動物學(xué)習(xí)記憶測試方法,現(xiàn)以步入法為例說明如下。